生物工程考研(生物工程考研可以考哪些专业)

生物工程考研,生物工程考研可以考哪些专业目前世界范围内使用最广泛并且最有效的驱蚊剂是避蚊胺,但是由于一些蚊子种群对避蚊胺产生了抗药性,所以找到合适的替代品迫在眉睫。此…

生物工程考研,生物工程考研可以考哪些专业

目前世界范围内使用最广泛并且最有效的驱蚊剂是避蚊胺,但是由于一些蚊子种群对避蚊胺产生了抗药性,所以找到合适的替代品迫在眉睫。

此前有研究显示,让猫 “嗨” 起来的猫薄荷能对昆虫(特别是蚊子)产生强大的趋避作用,已被公认为是传统合成化学杀虫剂(DEET)的天然替代品。


(来源:The Catnip Times)

猫薄荷里起到驱蚊作用的关键成分是荆芥内酯,这是驱蚊的关键成分。

荆芥内酯可对大约 75% 的猫产生特殊作用。猫对此物质的反应与基因有关,感知的位置为嗅上皮(olfactory epithelium)。对人类而言,荆芥内酯具有许多较缓和的影响,可用作弱安眠药、抗痉挛药、退热药与抗细菌药。

但是由于从猫薄荷中直接提取荆芥内酯的效率和产量不足,导致它无法应用于规模化生产。

多年来,科学家们致力于使用真核宿主酿酒酵母微生物合成荆芥内酯,目前已实现采用基于酵母的全细胞生物催化,通过四步酶法从低成本前体生产半生物合成荆芥内酯,随后的因子设计和响应面方法优化方法使荆芥内酯滴度增加了 5.8 倍,达到 153 mg/L。


图 | 荆芥内酯提取物

但这一技术的实现并不是一蹴而就的,其中也走了很多弯路。

来自康考迪亚大学的 Vincent Martin 团队 2016 年左右基于当时的酵母菌株生产出了 11.4mg/L 的前体香叶醇,在引入 G10H 后,该菌株成功地产生了 5.3mg/L 的 10 - 羟基香叶醇,但是在表达 10HGO 和 ISY 后,GC-MS 检测不到香叶醇、10 - 羟基香叶醇、10 - 氧代香叶醇或荆芥内酯醇,而是观察到香茅醇和 10 - 羟基香茅醇等分流产物的显着峰。后来,发现 ISY 是一种将碳源通量转移到分流产物的混杂酶。

随后,来自加利福尼亚大学化学与生物分子工程系的 John M. Billingsley 团队尝试利用 NEPS1 环化酶 / 氧化酶从提供的底物 8 - 羟基香叶醇中生产荆芥内酯前体,而 8 - 羟基香叶醇可以利用醋酸香叶酯轻松合成,从而提高了该生物过程的经济可行性。

在这项研究中,NEPS1 用于使用全细胞生物催化在酿酒酵母中生产半生物合成荆芥内酯,对生物转化工艺参数进行了一次一个因素和多变量优化;执行 RSM 方法的预测导致产品滴度增加 5.8 倍。


图丨在酵母中生产荆芥内酯的策略。荆芥内酯的生产需要 NAD+依赖性香叶醇氧化还原酶(GOR)和 NAD (P) H 依赖性环烯醚萜合酶 (ISY) 的表达(图 A)。以前在野生型酵母菌株中表达 GOR 和 ISY 可以阐明两条代谢途径的终止,现在下游酶 NEPS1 可以通过立体选择性环化和之后氧化来提供荆芥内酯(图 A)。NEPS1 将荆芥内酯中不稳定的半缩醛氧化为内酯,提供更稳定的最终产品,不易开环或差向异构化,促进代谢物分析和生物催化剂产品的纯化。MLS1 启动子和 SPG5 终止子被选择用于协调基因表达,它们与驱动 GOR 和 ISY 表达的启动子和终止子具有大致相同的诱导和表达谱,使用酵母同源重组方法将表达盒克隆到 GOR 和 ISY 下游,产生质粒 pJB133(图 B),并转化酵母菌株 YJB051,进行了标准的单次补料分批生物转化,通过 GC-MS 观察到荆芥内酯的产量为 26 mg/L,对应的产量为 0.08(实际 / 理论)(来源:研究论文)

不过他们还需要研究荆芥内酯可以作为猫引诱剂的特点,以防我们带着这种分子,虽然达到了驱蚊的效果,但是却面临着猫在追你的情形。


图 | 吸猫薄荷四连拍

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